xCELLigence Real-Time Cell Analysis(RTCA)는 세포에 별도의 fluorescent 또는 colorimetric label을 추가하지 않고 세포의 부착과 형태 변화에 따른 impedance 변화를 측정하여 살아있는 세포의 상태를 시간의 흐름에 따라 연속적으로 분석합니다.
소규모 분석부터 migration/invasion, 다중 플레이트 및 high-throughput 분석까지 xCELLigence RTCA 제품군을 확인할 수 있습니다.
일반적인 endpoint assay는 연구자가 결정한 특정 시점에서 세포의 상태를 측정합니다. 하지만 세포는 그 측정 시점 사이에서도 끊임없이 변화합니다.
약물 처리 직후 나타나는 빠른 반응, 일시적인 growth inhibition 이후의 recovery, 시간이 지난 뒤 나타나는 delayed cytotoxicity처럼 세포 반응의 시작 시점과 변화 속도 는 하나의 endpoint만으로 충분히 설명하기 어려울 수 있습니다.
특정 시점에서 세포 상태를 정량화합니다. 명확한 endpoint를 제공하지만 측정 시점 사이에서 발생한 cellular event는 확인하기 어렵습니다.
동일한 well의 cellular response를 시간에 따라 반복 측정하여 반응의 시작, 속도, 지속시간 및 회복 여부를 포함한 dynamic response profile을 확보할 수 있습니다.
16-well E-Plate 기반으로 세포 증식, 부착, 생존성 및 세포독성 반응을 라벨 없이 실시간으로 추적하는 컴팩트한 시스템입니다.
제품 상세보기xCELLigence RTCA 시스템은 E-Plate well 바닥에 통합된 microelectrode biosensor를 이용합니다.
세포가 electrode surface에 부착하고 spreading하면 전극 주변의 electrical impedance가 변화합니다. 세포 수, morphology 및 substrate attachment가 변화함에 따라 impedance 역시 달라지고, 시스템은 이러한 변화를 Cell Index 라는 정량적 값으로 변환합니다.
Cell Index에는 electrode와 상호작용하는 세포의 수뿐 아니라 세포의 부착 정도, spreading, morphology 및 viability와 관련된 변화가 복합적으로 반영될 수 있습니다. 따라서 RTCA 데이터는 살아있는 세포의 전체적인 dynamic behavior를 해석하는 kinetic readout으로 활용됩니다.
E-Plate에 세포를 seeding한 이후부터 측정을 시작하면 세포의 attachment, spreading, proliferation 및 treatment response가 시간에 따른 Cell Index curve로 기록됩니다.
세포가 electrode surface에 부착하면서 Cell Index가 변화하기 시작합니다.
부착된 세포가 spreading하면서 electrode coverage가 증가합니다.
세포 성장과 함께 Cell Index의 kinetic profile이 형성됩니다.
Compound, drug 또는 biological agent를 원하는 시점에 처리합니다.
Growth inhibition, cytotoxicity, recovery 등의 변화를 추적합니다.
RTCA는 단순한 세포 증식 측정을 넘어 세포독성, 약물 반응, 세포 부착 및 migration/invasion 등 시간 의존적인 다양한 cellular event를 분석하는 데 활용할 수 있습니다.
세포 증식에서 중요한 것은 최종 cell number뿐만 아니라 증식이 언제 시작되고 어느 속도로 진행되는지입니다. RTCA를 이용하면 lag phase에서 growth phase 및 plateau에 이르는 변화를 연속적으로 관찰할 수 있습니다.
약물 또는 test compound 처리 후 Cell Index의 변화를 연속적으로 측정하여 cytotoxic response가 언제 시작되는지, 얼마나 빠르게 진행되는지 그리고 시간이 지나면서 회복되는지를 확인할 수 있습니다.
서로 다른 농도의 compound를 처리하여 concentration-dependent cellular response를 비교할 수 있습니다. 단순한 최종 viability뿐 아니라 각 농도에서 나타나는 response kinetics의 차이를 함께 확인할 수 있습니다.
세포가 extracellular matrix 또는 substrate에 부착하고 spreading하는 과정 역시 impedance 변화로 관찰할 수 있습니다. ECM coating 및 cell-substrate interaction 조건 최적화에도 활용할 수 있습니다.
약물 효과는 exposure time에 따라 변화할 수 있습니다. 12시간, 24시간, 48시간 또는 72시간에서 관찰되는 dose-response relationship이 서로 다를 수 있으며, 이에 따라 계산되는 IC50 역시 달라질 수 있습니다.
대규모 세포 기반 assay와 compound screening을 위해 보다 높은 처리량의 label-free real-time cell analysis를 구성할 수 있는 RTCA 플랫폼입니다.
제품 상세보기적절한 xCELLigence RTCA configuration과 CIM-Plate를 이용하면 세포 migration 및 invasion을 실시간으로 분석할 수 있습니다.
세포가 membrane을 통과하여 electrode가 위치한 영역으로 이동함에 따라 발생하는 impedance 변화를 연속적으로 측정하여 시간에 따른 cell migration behavior를 확인할 수 있습니다.
이를 통해 chemotaxis, metastatic potential, migration inhibitor 및 extracellular matrix를 통과하는 invasive behavior 등을 비교할 수 있습니다.
세포 증식과 생존성 분석뿐 아니라 CIM-Plate를 이용한 migration 및 invasion 분석까지 수행할 수 있는 다목적 RTCA 플랫폼입니다.
제품 상세보기두 조건이 48시간 시점에서 비슷한 결과를 나타내더라도 그 시점에 도달하기까지의 과정은 서로 다를 수 있습니다.
한 조건에서는 처리 직후 Cell Index가 급격히 감소한 후 다시 회복할 수 있고, 다른 조건에서는 장시간에 걸쳐 점진적으로 감소할 수 있습니다.
단일 endpoint에서는 비슷해 보이는 결과도 전체 kinetic curve에서는 서로 다른 cellular behavior로 구분될 수 있습니다.
Impedance 기반 RTCA workflow에서는 일반적인 optical endpoint detection을 위한 fluorescent 또는 colorimetric labeling 없이 세포의 변화를 추적할 수 있습니다.
별도의 optical label 없이 cellular impedance를 기반으로 측정합니다.
동일한 well에서 시간에 따른 cell response를 연속적으로 추적합니다.
각 time point마다 별도의 well을 희생하는 endpoint 방식과 차별화됩니다.
response onset, duration, recovery 등 시간 기반 정보를 확보할 수 있습니다.
RTCA와 conventional endpoint assay는 서로 대체하는 기술이라기보다 연구 질문에 따라 상호 보완적으로 활용할 수 있습니다.
| Analysis | Conventional Endpoint | RTCA |
|---|---|---|
| Detection | Fluorescence / Luminescence / Absorbance 등 | Cellular Impedance |
| Measurement | 특정 시점 | Continuous Kinetics |
| Label | Assay에 따라 필요 | Label-Free Impedance |
| Response Onset | 확인 제한 | 시간에 따라 관찰 |
| Recovery | 놓칠 수 있음 | Kinetic Curve에서 확인 |
| Delayed Response | 측정 시점에 따라 제한 | 연속적인 변화 확인 |
| Multiple Time Points | 일반적으로 여러 well 필요 | 동일 well 연속 측정 |
RTCA, Cytation 그리고 NovoCyte는 같은 세포를 연구하더라도 서로 다른 질문에 답하는 분석 기술입니다.
세포가 언제 반응하기 시작하고 그 반응이 얼마나 빠르게 진행되며 시간에 따라 어떻게 변화하는지 분석합니다.
세포 형태, fluorescence signal, spatial information 및 image-based phenotype을 분석하는 데 활용할 수 있습니다.
세포 population별 marker expression, phenotype 및 heterogeneous cell population을 flow cytometry로 분석합니다.
실시간 impedance 기반 정량 분석과 live-cell imaging을 결합하여 세포 반응의 kinetics와 형태 변화를 함께 확인할 수 있습니다.
제품 상세보기RTCA에서 흥미로운 kinetic response를 확인한 후 연구 목적에 따라 imaging, flow cytometry, plate reader assay 등을 이용하여 해당 반응을 추가적으로 분석할 수 있습니다.
세포 반응은 하나의 숫자로만 설명되지 않습니다.
반응이 언제 시작되는지, 얼마나 빠르게 진행되는지,
일시적인 변화인지 지속적인 변화인지 그리고
세포가 다시 회복하는지를 함께 이해해야
cellular response에 대한 보다 깊은 정보를 얻을 수 있습니다.
xCELLigence RTCA는 label-free impedance technology를 이용하여
이러한 cellular kinetics를 실시간으로 관찰할 수 있도록 합니다.
S16 · SP · DP · MP · HT · Cardio · CardioECR · eSight 등 실험 규모와 연구 목적에 맞는 제품을 확인할 수 있습니다.
연구 목적과 세포 모델에 맞는 xCELLigence RTCA 시스템, 실험 workflow 및 적용 방법에 대해 상담해 보세요. 와이바이오텍이 연구 환경에 맞는 분석 구성을 함께 검토해 드립니다.